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N-糖基化修饰组
N-糖基化(N-Glycosylation)是最重要的蛋白质翻译后修饰之一,主要在复杂的多细胞或组织形成过程中起关键作用,参与细胞与细胞的连接、受体配体的相互作用、免疫应答、细胞凋亡及各种发病机理等生物学过程。拜谱生物N-糖基化蛋白质修饰组,利用凝集素富集N-糖基化肽段,高通量,高分辨,可分析不同实验条件下糖基化蛋白质组变化及信号通路,以及候选糖蛋白标志物的筛选等。
N-糖基化修饰组
原理/实验流程
碳水化合物子本身的比较复杂和越来越多N-glycoproteins低体现情况能让对N-glycosylation格局的定性分析的形容多的近义词难点。在监测低丰度的N糖基化装饰淀粉酶或肽段时,另外参杂大规模未装饰的淀粉酶肽断,这很极易将低丰度的糖基化装饰淀粉酶肽段的的信号盖住。凝素亲和法是日前糖淀粉酶质组学中应该用更广泛的脱离生物富集措施。凝集素(lectin)都是类糖相凭借淀粉酶质,能爱情专一鉴别某一些特殊性格局的单糖或聚糖中对应的糖基队列而与之相凭借,它是与糖链可逆反应非共价相凭借,糖淀粉酶或糖肽被凝集素采集最后,一般性用对应的单糖凭借的竞争相凭借凝集素将糖淀粉酶或糖肽冲洗掉之后。 蛋白酶酶质路经酶解后应用凝集素(lectin)聚集N-糖基化肽段,其次用N-糖酰胺酶(PNGase)在H218O中去除接在天冬酰胺残基(Asn)上的糖链。该治理迫使Asn原子量增多2.9890Da。还有用高gps精度LC-MS质谱仪探测脱糖后的肽段,完成索引sql语句库,核对脱糖后原子量和认识论原子量的变换已经糖基化掩盖肽段的编码序列,因此判定该蛋白酶酶质的N-糖基化位点。N-糖基化位点判定此后,再应用label-free的的原理对其实行按量进行分析。

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产品特色
  • 01大规模的蛋白质组N-糖基化位点的鉴定与分析

  • 02采用凝集素特异性富集N-糖基化肽段
  • 03高通量,高分辨

应用方向
  • 01
    不同实验条件下糖基化蛋白质组变化及信号通路分析

  • 02
    筛选候选糖蛋白标志物


送样建议
样本类型 常规送样量
植物叶片 湿重≥3g
植物根茎、木质部、韧皮部等 湿重≥5g
细胞样品 细胞量湿重≥5*10^7
组织样品 人、动物、微生物湿重≥50mg
体液样品 血清、血浆体积≥200μl,脑脊液≥500μl,尿液≥1000μl
参考文献
1、Zielinska DF, Gnad F, Schropp K, Wi?niewski JR, Mann M. Mapping N-glycosylation sites across seven evolutionarily distant species reveals a divergent substrate proteome despite a common core machinery. Mol Cell. 2012;46(4):542-548. doi:10.1016/j.molcel.2012.04.031
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